公司简介： 盐城君行生物科技有限公司是一家专注于生命科学领域的高新技术企业，致力于为全球科研机构、高等院校、
医疗机构及生物医药企业提供高品质的科研试剂、技术服务与整体解决方案。公司秉承"以科技赋能研究，以服务创造价值"
的理念，始终将技术创新与客户需求置于首位，助力生命科学领域的研究突破与产业发展。
----------------路漫漫其修远兮，君行伴您行万里
试剂盒分类：
按种属分：大鼠e l i s a试剂盒,人e l i s a试剂 盒，小鼠e l i s a试剂盒，兔e l i s a试剂盒等。
按方法学分：双抗夹心（我们的产品大部 分就是双抗夹心的），竞争法，间接法等（以上君行试剂盒均可以做）。
样本类型：
十大样本类型：血清、血浆、组织匀浆、 细胞培养上清、裂解液、脑脊液、体液、 尿液、乳液、唾液上面未体现的样本类型 可以先咨询。
各项样本处理方法：
血清：
① 使用无热原、无内毒素的试管或离心管采集血液样本，将试管或离心管在室温下放置1小时或2-8℃过夜，分离出血清；
② 2-8℃条件下，以1000×g离心20分钟，小心收集上层血清（放入空白无菌无酶EP管收集）。
血浆：
① 使用含抗凝剂的采血管或离心管采集血液样本，采集后30分钟内，2-8℃条件下，以1000×g离心15分钟，
小心收集上层血浆；
② 常见的抗凝剂包括：EDTA钠盐，肝素钠，枸橼酸钠等。ELISA实验中，通常推荐EDTA盐（EDTA-Na2或EDTA-K2）
作为抗凝剂。
组织匀浆：
匀浆介质：一般采用0.05 mol/L Tris-HCl, pH 7.4 磷酸盐缓冲液(PBS),客户可根据样本及测定指标的情况自行设定浓度,
目的是保持样本的等渗环境。
组织匀浆的制备：
1、取组织块（0.2g～0.5g）最少可到20～50mg在冰冷的PBS中漂洗，滤纸拭干，准确称重，放入5ml的匀浆管中。
2、按重量(g):体积(ml)=1:9的比例加入9倍体积的匀浆介质于匀浆管中，冰水浴条件下,用眼科小剪尽快剪碎组织块。
3、匀浆的方式：手工匀浆，机器匀浆。
① 手工匀浆：左手持匀浆管将下端插入盛有冰水混合物的器皿中，右手将捣杆垂直插入套管中，上下转动研磨数十次
（6～8分钟），充分研碎，制成20%的匀浆液。
② 机器匀浆：用组织捣碎机10000～15000 转/分 上下研磨制成10%组织匀浆，也可用内切式组织匀浆机制备（匀浆时
间10秒/次，间隙30秒，连续3～5次，在冰水中进行,可适当延长匀浆时间），
镜检观察:取少量组织匀浆作涂片（直接涂片、染色均可以），显微镜下观察细胞是否破碎，若没有则可延长匀浆时间。
4、将制备好的10%匀浆液用普通离心机或低温低速离心机4000转/分左右,离心10～15分钟，取上清液进行测定.
细胞培养上清（测分泌指标）：
需保证各组间培养细胞的数量基本一致，细胞生长状态良好。建议采用6孔板培养细胞，并保证细胞数量达到106左右，
即细胞密度达70%-80%左右，即可收集培养液，于2-8℃、1000×g离心20分钟，除去杂质及细胞碎片，取上清检测。
细胞裂解液（测胞内指标）：
贴壁细胞用冷的PBS轻轻清洗，然后用胰蛋白酶消化，1000×g离心5分钟后收集细胞；悬浮细胞可直接离心收集。
收集的细胞用冷的PBS洗涤3次。每106个细胞中加入150-200μL PBS重悬（推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂；若含量
很低，可减少PBS的体积），并通过反复冻融或超声，使细胞破碎。将提取液于2-8℃、1500×g离心10分钟，取上清检测。
■ 反复冻融：-80℃放置1h/液氮放置0.5h，然后置于30℃水浴锅中，轻微振荡，使其迅速融化，此操作反复2-3次即可。
■ 超声方法：用超声波发生器，以振幅14μm超声处理30 s，在冰水浴条件下，破碎细胞；或者使用超声波破碎仪，
200 W，2 s/次，间隙3 s，总时间5 min。
样本中建议提前加入蛋白酶抑制剂，常规推荐PMSF：工作浓度:17~174μg/mL(0.1~1mM)。
其他体液样本处理原则（如脑脊液、 尿液、乳液、唾液、肺泡灌洗液）：所有的液体样本，用无菌管收集，
2-8℃条件下，以1000×g离心20分钟。
样本本收集注意事项：
1.血液样本采集时应尽可能避免溶血现象!
2.收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒，充分抗凝，防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固。
3.组织与细胞提取波样本收集时不建议使用商品化的裂解试剂，聚解液中的表面活性剂可能会影响传检由于是新
引入的物质的天然构象，可能会出现制道的显海保或者假洞性。此外，试剂，不确定基质干扰的情况，可能会造
成本底升高，从而影响测定值难定性。
4.避免使用高血脂样本，高脂样本含有脂肪，不是均质溶液，若直接上样会影响抗原抗体的结合，从而影响测值
准确性。
5.样品收集后若在1周内进行检测可保存于2-8℃，若不能及时检测，请按一次使用量分装，冻存于-20℃或-80℃，
避免反复冻融。
送样单：
ELISA实验送样单.doc
地址：代测注意事项: 1: 样本需要干冰加泡沫箱，顺丰快递寄出。2: 代测信息表务必填写清楚样本编号(和管子编号致)
和样本分组情况。3：寄样地址:江苏省盐城市大丰区丰华街道新北路北侧广丰路东侧3幢4层。